紫外可見光分光光度計的工作原理是由光源發(fā)出連續(xù)輻射光,經單色器按波長大小色散為單色光,單色光照射到吸收池,一部分被樣品溶液吸收,未被吸收的光經檢測器的光電管將光強度變化轉變?yōu)殡娦盘栕兓?,并經信號顯示系統(tǒng)調制放大后,顯示或打印出吸光度A(或透射比T),完成測定。
紫外可見光分光光度計由光源室、單色器、樣品室、光電管暗盒、電子系統(tǒng)及數(shù)字顯示器等部件組成,儀器內部光路系統(tǒng)。從鎢燈或氫燈發(fā)出的連續(xù)輻射經濾色片選擇聚光鏡聚光后投向單色器進狹縫,此狹縫正好位 于聚光鏡及單色器內準直鏡的焦平面上,因此進入單色器的復合光通過平面反射鏡反射及準 直鏡變成平行光射向色散光柵。光柵將入射的復合光通過衍射作用形成按照一定順序均勻排 列的連續(xù)單色光譜,此時單色光譜重新返回到準直鏡,然后通過聚光原理成像在出射狹縫上 。出射狹縫選出帶寬的單色光通過聚光鏡落在試樣室被測樣品中心,樣品吸收后透射的 光經光門射向光電管陰極面。根據光電效應原理,會產生一股微弱的光電流。
紫外可見光分光光度計主要由電光系統(tǒng)、光學系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)和數(shù)據處理、輸出打印系統(tǒng)等幾個部分組成。
紫外可見光分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。紫外可見分光光度計是各種涉及水和廢水分析領域的通用儀器,應用范圍包括市政和工業(yè)廢水,飲用水,加工過程用水,地表水,冷卻水和鍋爐補給水等。
紫外可見光分光光度計安裝環(huán)境的要求有:
(1)實驗室環(huán)境要求:主要包括環(huán)境溫濕度、環(huán)境潔凈狀況、光及磁場干擾等。具體要求如下:
?、侪h(huán)境溫濕度 儀器應安放在干燥的房間內,使用溫度為5~35℃,相對濕度不超過85%,應控制在45%~65%,無冷凝。如有條件,應配備去濕機(空調)、濕度計等,在相對濕度較大的地區(qū)應在儀器周圍放一些干燥劑。
?、跓o強光干擾及磁場干擾 室內照明不宜太強,且避免直射日光的照射。儀器應盡量遠離高強度的磁場、電場及發(fā)生高頻波的電器設備,防電磁干擾。
③防止腐蝕性氣體 避免在有硫化氫、:二氧化硫以及各種酸霧等腐蝕性氣體的場所使用,以免侵蝕儀器的約部件。
在使用紫外可見分光光度計時,需要注意一些使用的維護措施:
1、使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時,手指應拿毛玻璃面的兩側,裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時應加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4、測定時除另有規(guī)定外,應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規(guī)定的吸收峰±2nm以內,測幾個點的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度zui大的波長作為測定波長,除另有規(guī)定外吸收度zui大波長應在該品種項下規(guī)定的測定波長±2nm以內。
5、選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準,對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。